Анализ результатов работы кори
Корь – высококонтагиозное антропонозное острое инфекционное заболевание с воздушно-капельным путем передачи. Возбудитель кори – РНК содержащий вирус (семейство Paramyxoviridae, род Morbillivirus). Только 1% восприимчивых лиц не заболевает корью при первом тесном контакте с больным.
Корь начинается с продромального периода, для которого характерны повышение температуры тела до 38°С и выше, кашель, насморк, чихание, покраснение глаз и светобоязнь, энантема в полости рта (пятна Филатова-Коплика). С 4-5 дня болезни наблюдается поэтапное высыпание пятнисто-папулезной сыпи (на первый день сыпь появляется на лице и шее, на второй день – на туловище, на третий день – на ногах и руках), на месте сыпи остается пигментация и отрубевидное шелушение. Инкубационный период длится в среднем около 10 дней (от 7 до 18 дней) с момента инфицирования дыхательных путей и до повышения температуры.
Несмотря на наличие доступных высокоиммуногенных вакцин, корь все еще остается одной из основных причин детской смертности в развивающихся странах и периодически приводит к возникновению крупных вспышек в индустриально развитых странах. В 2010-2011 годах крупные вспышки кори были зарегистрированы в ряде стран Африки, Юго-Восточной Азии и Европы (Франция, Германия, Болгария, Румыния). Особенно тревожная ситуация сложилась в 2012 году на Украине, где за три месяца заболело более 10000 человек. В Российской Федерации, большинство административных территорий которой в январе 2011 года были сертифицированы на отсутствие эндемичной кори, ситуация осложнилась в 2011-2012 годах в Южном и Северокавказском Федеральных округах, в Москве, Санкт-Петербурге и ряде других городов.
Вирус кори присутствует в крови, носоглоточных выделениях и моче во время продромального периода и в течение 3-4 дней с момента появления сыпи. АТ к вирусу кори впервые можно обнаружить в крови с момента появления сыпи. Максимальный уровень содержания АТ IgM в крови приходится на 4-7 дни после появления сыпи, они сохраняются в течение 28 дней, в редких случаях их можно обнаружить спустя 8 недель с момента появлении сыпи. АТ IgG начинают вырабатываться с момента появления сыпи и достигают максимального уровня через 2 недели; их можно выявить в течение долгих лет после перенесенной инфекции.
Показания к обследованию. Больные с диагнозом «корь», «корь ?» и с другими клиническими диагнозами, имеющие пятнисто-папулезную сыпь и температуру тела 37,5°С и выше.
Дифференциальная диагностика. Заболевания, протекающие с мелкопятнистой экзантемой (краснуха, скарлатина, инфекционный мононуклеоз, лекарственные и аллергические экзантемы, протекающие с повышением температуры тела).
Этиологическая лабораторная диагностика включает выделение вируса кори, выявление РНК вируса кори, обнаружение АТ к вирусу кори.
Материал для исследования
- Сыворотка крови – выявление АТ;
- моча, назофарингиальные смывы, лимфоциты периферической крови – выделение вируса кори;
- мазки из носоглотки и ротоглотки – выявление РНК вируса.
Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики. Лабораторная диагностика коревой инфекции в рамках Программы элиминации кори в РФ проводится только в вирусологических лабораториях Региональных центров по эпидемиологическому надзору за корью с помощью тест-систем, рекомендованных ВОЗ. Для лабораторной диагностики кори применяют главным образом выявление АТ к вирусу (серологическая диагностика). Для диагностики кори используют как обнаружение АТ отдельных классов (IgM и IgG), так и количественное определение специфических АТ в крови для установления их значимого прироста при одновременном исследовании двух проб, полученных от больного в остром периоде и в период реконвалесценции (парные сыворотки).
Для выявления вирусоспецифических АТ IgM и IgG в настоящее время используется преимущественно метод ИФА. Благодаря высокой чувствительности и специфичности, простоте и скорости выполнения, возможности автоматизации исследования, метод доступен любой лаборатории. Для получения корректных результатов и облегчения их интерпретации большое значение имеет правильно выбранное по отношению к появлению клинических симптомов кори время забора образца.
Для выявления изменения уровня суммарных АТ с использованием реакции нейтрализации (РН) цитопатического действия вируса кори, требуется наличие двух образцов сыворотки крови, взятых у больного в остром периоде заболевания и на стадии реконвалесценции. Метод обладает 100% чувствительностью по отношению к клинически подтвержденным случаям. Этот тест не является легким в применении, потому что он требует наличия высококвалифицированного персонала, имеющего опыт работы с культурами клеток. Результаты анализа могут быть получены через 10 дней после получения сыворотки реконвалесцента.
Оценка изменения содержания специфических АТ с использованием метода РТГА также требует наличия двух образцов сыворотки крови, полученных у больного в остром периоде и на стадии реконвалесценции. У вакцинированных лиц метод демонстрирует 98% чувствительность. Этот тест также не является легким в применении, потому что требует высококвалифицированного персонала, а также наличие свежих эритроцитов обезьян. Результаты анализа могут быть получены через 2 дня после получения сыворотки реконвалесцента.
Выделение вируса кори выполняют на культуре клеток Vero. Обнаружение и идентификация вируса кори на культуре клеток может занять несколько недель, поэтому не рекомендуется использовать этот метод для первичной диагностики инфекции, изоляция вируса кори проводится в специализированных лабораториях.
Выявление РНК вируса методом ПЦР с обратной транскрипцией не получило пока широкого распространения. Секвенирование генома вируса кори применяется в целях определения генотипа возбудителя кори. Генетический анализ позволяет сравнивать штаммы, полученные из различных мест в разные годы, что позволяет получить информацию о происхождении вирусов и проследить пути их передачи.
Показания к применению различных лабораторных исследований. Для диагностики кори ВОЗ рекомендует использовать обнаружение вирус-специфических IgM методом ИФА в образце сыворотки крови, взятом после четвертого дня от момента появления сыпи. Взятие крови для исследований осуществляется на 4-7 день с момента появления сыпи.
При выявлении АТ IgМ к вирусу кори у пациентов с лихорадкой и пятнистопапулезной сыпью, обследуемых в рамках активного эпидемиологического надзора за корью, дополнительно проводится исследование для выявления АТ IgG методом ИФА в «парных сыворотках». Взятие крови для исследований осуществляется на 4-7 день с момента появления сыпи (1-я сыворотка) и не ранее чем через 10-14 дней от даты взятия первой пробы (2-я сыворотка).
Для определения напряженности иммунитета к вирусу кори ВОЗ рекомендует применять выявление АТ IgG в сыворотке крови методом ИФА.
Для выявления вируса кори и его РНК используют биоматериалы, взятые в продромальный период заболевания и в первые три дня после появления сыпи. При взятии образцов следует учитывать, что интенсивность экскреции вируса быстро падает.
Особенности интерпретации результатов лабораторных исследований. Вирусоспецифические АТ IgM появляются в течение первых дней с момента высыпания, спустя месяц их уровень начинает быстро снижаться. Их наличие в крови пациента достоверно свидетельствует об острой свежей инфекции. АТ IgM также вырабатываются при первичной вакцинации и, хотя их уровень снижается быстрее, чем уровень АТ IgM, вырабатывающихся в ответ на инфицирование диким вирусом, специфические АТ IgM к дикому или вакцинному вирусу не могут быть разделены используемыми в рутинной диагностике методами. В этом случае для интерпретации полученных результатов следует обратиться к истории вакцинации конкретного пациента.
Поскольку исследование АТ IgM методом ИФА обладает максимальной чувствительностью между 4-м и 28-м днями от момента появления сыпи, то исследование образца крови, полученного в эти сроки, считается адекватным для диагностики кори. Повторное взятие образца крови может понадобиться в случае отрицательного результата выявления АТ IgM в первом образце крови, полученном в течение первых трех дней от момента появления сыпи. Повторное взятие крови для выявления АТ IgG выполняют через 10-14 дней после взятия первого. Нарастание титра специфических АТ IgG в 4 и более раза при одновременном исследовании обеих проб с использованием стандартных тестов является основанием для постановки диагноза «корь».
Источник
Для постановки диагноза корь зачастую необходимо лабораторное
подтверждение инфекции. Самое лучшее время для сдачи анализов — первый контакт
пациента с врачом. Врача необходимо вызывать на дом, так как корь — это заразное
заболевание и поход в поликлинику может стать причиной заражения многих восприимчивых
детей и взрослых. Забор материала для исследования может выполнить врач или
медсестра, которую доктор может прислать чуть позже.
1 больной корью может заразить 12—18 восприимчивых человек [1]. Подробнее в статье «Как можно заразиться корью?».
Стандартом лабораторной диагностики кори в большинстве стран
являются серологическое исследование и ПЦР-диагностика.
1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР).
Суть метода заключается в идентификации РНК вируса кори в крови,
слизи носоглотки/ротоглотки, бронхиальном секрете или моче.
ПЦР-исследование рекомендуется проводить как можно раньше после
появления сыпи, так как количество вируса в организме снижается с течением
времени. Наиболее информативным является период первых 1—3—7 дней от начала
высыпаний [2—5]. В литературе имеются сведения о том, что у некоторых пациентов
вирус кори может определяться в носоглоточном секрете до 10—14 дня болезни [5].
Для наиболее точной диагностики рекомендуется производить забор
материала из трех разных локусов (кровь, мазок из носоглотки или ротоглотки и
моча). Это повышает вероятность правильного диагноза [4,5].
После забора материала для ПЦР (мазок и моча) допустимо его хранение
до 1 суток в холодильнике (4 °С), возможно замораживание. Если для исследования
используется моча, то ее объем должен быть не менее 10 мл, но лучше 50 мл. Утренняя
первая моча содержит максимальное количество вируса [4].
Отрицательный результат ПЦР не исключает диагноза кори [6].
Ложноотрицательный результат может быть получен при позднем заборе
материала (более 3—7 дней с момента появления сыпи), предшествующей недавней
вакцинации против кори, при нарушениях хранения и/или транспортировки образцов
[4,5].
В соответствии с международными рекомендациями при выполнении ПЦР
желательно определять генотип вируса кори. Это необходимо для четкого
различения происхождения вируса (дикий штамм или вакцинный), учета
распространения вируса по земному шару и происхождения очагов/вспышек
заболевания [4].
На сегодняшний день известно 24 генотипа вируса кори. Большинство
из них вышло из циркуляции, однако менее 10 из них (по данным ВОЗ — 6 [7]) все еще присутствуют на нашей планете [8].
2. Серологический метод.
Метод заключается в определении специфических антител (IgM и IgG) против вируса кори в сыворотке крови.
Для верификации диагноза кори достаточно определить один класс
антител IgM или IgG. Каковы особенности анализа?
— IgM.
IgM определяется в крови в течение 1 месяца (28 дней [3]) у больного
корью после появления высыпаний. Пик IgM отмечается
на 7—10 сутки от момента появления сыпи, а затем количество антител постепенно
снижается. Через 6—8 недель от начала сыпи IgM уже может не
определяться [9].
Если больной ранее прививался против кори (1 или 2 прививки) то
при реинфекции вирусом кори IgM у него может не определяться
вовсе или быть повышенным только короткий промежуток времени, который трудно
зафиксировать [6].
Отрицательный анализ на IgM не исключает наличие заболевания у ранее привитых.
В некоторых случаях у ранее не привитых пациентов IgM может быть ложноотрицательными
(около 20—25% проб). Это характерно для образцов, взятых в первые 72 часа от
начала появления сыпи. Дело в том, что концентрация антител в первые дни
болезни еще мала и недостаточна для определения [10,11].
Если результат был отрицательным и сыпь присутствует более 72
часов должен быть выполнен повторный анализ (допустимо выполнить анализ до 10
дня болезни) [6].
Кроме того, ложноотрицательный результат может быть получен, если анализ выполнен позже 28 дней с момента появления сыпи.
Ложноположительный результат возможен при проведенной ранней
вакцинации против кори (в течение предшествующих 6 недель до появления сыпи), наличии
повышенного ревматоидного фактора, при сопутствующих острых воспалительных
заболеваний [5].
В каждом отдельном случае проводится изучение течения заболевания,
особенностей пациента и/или дополнительная диагностика.
Наряду с определением IgM / IgG для диагностики кори, также настоятельно рекомендуется выполнять ПЦР [12].
Положительный анализ на IgM только при
наличии характерной клинической картины и данных о контакте с больным
корью свидетельствует об остром течении коревой инфекции. Положительный
анализ на IgM при отсутствии характерной клинической картины или контакта с
больным корью не является основанием для постановки диагноза. В таких случаях
рекомендуется выполнить ПЦР исследование [3].
— IgG.
Определение IgG является информативным анализом
для подтверждения кори в случае отсутствия возможности провести ПЦР
исследование и/или когда IgM является отрицательным или
сомнительным [6].
Исследование проводится в парных сыворотках: первый анализ должен
быть выполнен в первые 4—7 дней от начала высыпаний, второй — в течение 10—30
дней после первого [2,3].
IgG достигают пика через 4 недели от начала сыпи [9].
Положительным результат считается, если:
— произошла сероконверсия (в первом анализе IgG
отрицательны, во втором — положительны);
— отмечается значительное (в 4 и более раз) повышение уровня IgG.
Сероконверсия не является информативной при недавно проведенной
вакцинации (в течение предшествующих 6 недель).
Ранее вакцинированные, получившие две прививки и не выработавшие
защитных антител (такое встречается, но очень редко), при заболевании корью
могут не иметь повышение IgG в 4 раза при втором анализе IgG по сравнению
с первым [3]. Отрицательное значение IgG в двух
анализах исключает наличие коревой инфекции.
ИФА — метод, одобренный ВОЗ для определения IgG и IgM для диагностики коревой инфекции [10].
3. Вирусологический метод.
Для идентификации вируса кори иногда может применяться вирусологический метод. Суть его заключается в том, что вирус, полученный от больного, культивируется в клеточной культуре. Этот метод является особо точным, но занимает около двух недель. Вирусологический метод не рекомендуется для рутинного обследования при подозрении на корь [2,5,6,8].
Источник
Анализ на антитела к кори – исследование, которое проводят детям, которые рискующим заболеть корью, беременным, чтобы узнать о существующем риске для плода, взрослым, если есть риск заражения. Повышенный интерес врачей к результатам такой диагностики обусловлен опасностью кори.
Антитела к кори – что это значит?
Корь – это острое инфекционное заболевание с очень высокой вероятностью заражения при контакте с носителем вируса. Повышенная восприимчивость людей к вирусу кори компенсируется сохраняющимся пожизненным иммунитетом после перенесенного заболевания или сделанной прививки. Отвечают за специфический иммунитет антитела к вирусу кори.
Выработка антител к кори происходит:
- при остром течении заболевания;
- после вакцинирования;
- после «скрытого» инфицирования корью, когда человек переболел незаметно для окружающих.
Как вырабатываются антитела в организме человека?
Антитела – это особые белки, связывающие антигены – чужеродные для организма вещества. При заболевании антигены попадают в организм естественным путем, при вакцинации – их вводят в составе вакцины. В организме выработка антител к инфекции осуществляется В-лимфоцитами и хранятся они в мембране этих лимфоцитов или плазме крови, а основная задача антител – иммунитет к заболеванию. К некоторым заболеваниям, например, к кори, защита вырабатывается пожизненная, к другим, например, к гриппу, постоянного иммунитета не вырабатывается.
В зависимости от возбудителя, антитела вырабатываются или сразу поле заражения, или после инкубационного периода. В настоящее время известно пять классов антител:
- IgG – наличие таких антител говорит о выработанном стойком иммунитете, но их наличие не указывает на конкретного возбудителя, вырабатываются эти антитела спустя 2-3 недели после начала заболевания и могут сохраняться пожизненно.
- IgЕ – наличие этих антител свидетельствует о присутствии в организме паразита и аллергических реакциях (ринит, отеки, высыпания).
- IgА – данные антитела вырабатываются при респираторных инфекциях и при инфекционных и неинфекционных поражениях печени, начинают выявляться в крови через 1-2 недели после инфицирования и перестают выявляться через 2-3 месяца, постоянное присутствие в крови говорит о хроническом заболевании.
- IgМ – присутствие этих антител говорит о присутствии в организме инфекции или о том, что человек совсем недавно переболел.
- IgD – малоизученный класс антител, не используется в диагностике.
Когда нужен анализ на антитела к кори?
Делать анализ на антитела к кори часто приходится беременным женщинам, у которых отсутствует информация о том, переносили они эту инфекцию или нет, была ли сделана прививка, и при этом существует риск заражения. Для беременных корь опасна серьезными последствиями:
- возможностью выкидыша;
- преждевременных родов;
- осложнениями течения болезни для самой женщины.
В некоторых случаях (на усмотрение врача) анализ на антитела к кори делают даже после перенесенной болезни или сделанной прививки, это необходимо, потому что:
- у небольшого количества людей (около 10%) иммунитет после прививки не вырабатывается;
- 20-30% людей утрачивают коревой иммуноглобулин из-за лечения иммунодепрессантами, антибиотиками или по другим причинам.
Определение антител к кори
Сдавать кровь на антитела к кори нужно, если
- не известно, была ли сделана прививка;
- необходимо подтвердить диагноз;
- произошел контакт с возможным заболевшим;
- при эпидемиологическом обследовании.
Корь в остром периоде проявляется очень ярко:
- высокая температура;
- коревая сыпь (пятна более 1 см в диаметре с папулой в центре);
- дыхательные проблемы;
- конъюнктивит;
- светобоязнь;
- отек век;
- кашель и насморк.
Анализ на антитела к кори – подготовка
По клинической картине корь легко определит врач, однако заражение окружающих происходит до появления высыпаний и об опасном заболевании они могут еще не подозревать. Если назначили обследование, нужно к нему подготовиться.
Анализ, определяющий антитела к кори, требует соблюдения ряда правил:
- Первое требование – приходить на анализ на антитела к кори натощак, последний прием пищи до забора крови – за 8 часов, с утра можно только выпить чистой воды.
- В день накануне анализа на антитела к кори нельзя пить спиртное, есть жирные, жареные и соленые блюда – это влияет на свертываемость крови и качества сыворотки.
- Нельзя сдавать анализ на наличие антител к кори на фоне некоторых лекарств – о лечении должен знать врач и лаборант, берущий кровь, по возможности – за сутки прием медикаментов следует прекратить.
Как сдавать анализ на антитела к кори?
Приходить на анализ крови на антитела к кори нужно утром. Перед походом в лабораторию нежелательно делать зарядку, испытывать эмоциональные нагрузки. До забора крови желательно посидеть, отдохнуть и успокоиться 10-15 минут. В зимнее время года нелишним будет и согреться – чтобы при заборе крови не возникло проблем. Анализ крови на маркеры кори берется из вены, поэтому важно не волноваться, чтобы забор прошел быстро и безболезненно.
Анализ на антитела к кори – расшифровка
Исследование на антитела к вирусу кори, расшифровка которого длится до 48 часов, проводится в медицинском учреждении.
Чтобы расшифровать результат, рассматривают антитела классов IgG и IgМ:
- оба показателя отрицательны – иммунитета к кори нет, инфекция в крови отсутствует;
- оба показателя положительны – корь перешла в финальную стадию, иммунитет выработан;
- IgG – положительный, IgM – отрицательный – иммунитет есть, кори нет;
- IgG – отрицательный, IgM – положительный – иммунитета нет, корь в самой начальной стадии.
Антитела к кори – норма
Расшифровка анализа основывается на показателе титр антител к кори, который бывает:
- менее 0,12 – в таком случае результат отрицательный;
- в промежутке от 0,12 до 0,18 – этот результат считается сомнительным, анализ рекомендуется пересдать через 7-14 дней;
- более 0,18 – положительные показатели антител к кори.
Антитела к вирусу кори IgG
Присутствующие в крови антитела к кори IgG свидетельствуют о перенесенном в прошлом заболевании или о присутствии инфекции в крови в настоящем времени, а также показывают напряженность иммунной системы против вируса кори. Наличие антител после вакцинации говорит о том, что иммунитет благополучно выработался. При заболевании антитела класса IgG появляются примерно через 3 недели после инфицирования, за 2 дня до появления сыпи.
Повторное вакцинирование от кори (при угасании иммунитета к заболеванию) приводит к быстрому росту антител IgG, которые обеспечивают защиту организма от опасной болезни. У младенцев до 6-7 месяцев наблюдается высокий уровень антител IgG – это материнские противокоревые антитела, которые защищают ребенка в первые месяцы жизни, но затем этот приобретенный от матери иммунитет угасает.
Антитела IgM к вирусу кори
Присутствующие в крови антитела класса IgM к вирусу кори свидетельствуют о начальной стадии заболевания и необходимости срочной медицинской помощи для предотвращения осложнений и заражения окружающих. После перенесенной кори антитела IgM сохраняются в крови несколько месяцев – по этому показателю можно понять, что человек недавно переболел опасным заболеванием.
Источник
